分子生物學(xué)實驗室規(guī)劃設(shè)計及凈化工程裝修要求

實驗室潔凈工程裝修，實驗室凈化工程設(shè)計主要是由我國空氣潔凈等級標(biāo)準(zhǔn)分為：100級、1000級、10000級、100000級等等。標(biāo)準(zhǔn)則劃分為：1級、2級、3級、4級、5級為準(zhǔn)。

基因擴增實驗室（PCR實驗室）：
PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個試驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排是氣流組織形式。同時，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。

試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)：
該實驗區(qū)主要進(jìn)行的操作作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū)，不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對氣流壓力的控制，本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。

標(biāo)本制備區(qū)：
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為相對于臨近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)域內(nèi)不必要的走動。

擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)：
擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)：該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為NDA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA（來自樣本制備區(qū)）的加入和主反應(yīng)混合液（來自試劑貯存和制備區(qū)）制備成反應(yīng)混合液等也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在巢氏PCR測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應(yīng)管。因此巢氏擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)域漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。

擴增產(chǎn)物分析區(qū)：
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測，此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于臨近區(qū)域為負(fù)壓，以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)域擴散至其它區(qū)域。

完備的實驗室配套設(shè)施：
完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。

實驗室凈化工程設(shè)計主要是通過人為的手段，應(yīng)用潔凈技術(shù)實現(xiàn)控制室內(nèi)空氣中塵埃、含菌濃度、溫濕度與壓力、以達(dá)到所要求的潔凈度、溫濕度和氣流速度等環(huán)境參數(shù)。空氣潔凈度是指潔凈空氣環(huán)境中空氣含塵量程度，空氣潔凈度的級別以含塵濃度劃分。潔凈度是指每升空氣中所含粒徑≥0.5um的塵粒的總顆粒。
實驗潔凈室一般實施兩級隔離，一級隔離通過生物安全柜、負(fù)壓隔離器、正壓防護(hù)服、手套、眼罩等實現(xiàn);二級隔離通過實驗室的建筑、空調(diào)凈化和電氣控制系統(tǒng)來實現(xiàn)。但由于凈化空調(diào)需要風(fēng)量小為了安全起見，風(fēng)量都按大的估算，一般都要超過規(guī)范規(guī)定，物別是百級以上，冷熱負(fù)荷在要求不是很嚴(yán)格的情況可能估算，現(xiàn)在專門有凈化空調(diào)機組，可以直接利用。二級~四級生物安全實驗室應(yīng)實施兩級隔離。一般實驗室裝備有:超凈工作臺、生物安全柜、邊臺或不銹鋼操作臺、洗滌臺等。

以PCR實驗室為例(PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))，是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，也是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的實驗技術(shù)。其特點是能將微量的DNA大幅增加，實驗室通常分為四個區(qū)域，即：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)(如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并)。進(jìn)入各個區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。

實驗室潔凈裝修，試劑儲存和準(zhǔn)備室(標(biāo)本制備區(qū))，儀器主要配置有：冷凍離心機、生物安全柜、冰箱、可移動紫外燈、全自動力核酸蛋白純化儀、專用工作服和工作鞋等。擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)配置有：冰箱、高速離心機、超凈工作臺、PCR儀(要求負(fù)壓狀態(tài))、可移動紫外燈、微量加樣器、核酸擴增儀等。擴增產(chǎn)物分析區(qū)主要配置有：移液器、振蕩器、超凈工作臺、毛細(xì)管電泳儀、冰箱、離心機、微量加樣器、可移動紫外燈等。